ELISA檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。如血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
今日，我們主要說明人ELISA檢測試劑盒的正確操作過程：
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
3、待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL。
4、隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中（空白孔不加）參與辣根過氧化物酶（HRP）符號的檢測抗體100μL，，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6、全部孔參與底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7、全部孔參與停止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波利益測定各孔的OD值。
注意事項(xiàng)：人ELISA檢測試劑盒在2-8℃，運(yùn)用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這歸于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運(yùn)用；實(shí)驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存；濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本現(xiàn)已稀釋5倍，zui終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度；嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)刻、加液量及次序進(jìn)行溫育操作。全部液體組分運(yùn)用前充沛搖勻。
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